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网吧病毒检测申请书篇一
诺瓦克病毒(norwalk viruses,nv)是人类杯状病毒科(human calicivirus,hucv)中诺如病毒(norovirus,nv)属的原型代表株。nv是一组形态相似、抗原性略有不同的病毒颗粒。诺瓦克病毒最早是从1968年在美国诺瓦克市暴发的一次急性腹泻的患者粪便中分离的病原。2002年8月第八届国际病毒命名委员会批准名称为诺如病毒(norovirus,nv)。诺如病毒与在日本发现的札幌样病毒(sapporo-like virus,slv),正式名称为札如病毒(sapovirus,sv),合称为人类杯状病毒。诺如病毒感染性腹泻在全世界范围内均有流行,全年均可发生感染,感染对象主要是成人和学龄儿童,寒冷季节呈现高发。
诺如病毒抗体没有显著的保护作用,尤其是没有长期免疫保护作用,极易造成反复感染。诺如病毒感染性强,以肠道传播为主,可通过污染的水源、食物、物品、空气等传播,常在社区、学校、餐馆、医院、托儿所、孤老院及军队等处引起集体暴发。诺如病毒有许多共同特征:直径约为26~35nm,无包膜,表面粗糙,球形,呈二十面体对称;从急性胃肠炎病人的粪便中分离,不能在细胞或组织中培养,也没有合适的动物模型;基因组为单股正链rna;在氯化铯密度梯度中的浮力密度为1.36~1.41g/cm3;电镜下缺乏显著的形态学特征,负染色电镜照片显示,nv是具有典型的羽状外缘,表面有凹痕的小圆状结构病毒。
诺如病毒根据遗传性分为5个基因组,至少有29个基因群,其中基因组i(ggi)有8个基因群,基因组ii(ggii)有17个基因群,基因组iii(ggiii)有2个基因群,基因组iv(ggiv)和基因组v(ggv)各有1个基因群。与人类有关的主要是ggi、ggii和ggiv。
一、标本采集注意事项:
粪便标本应在发病首日采集,至多不能超过发病急性期(48~72h),此时为稀、软便,病毒排出量最多。一次流行,至少采集10例患者粪便,每份标本量约1~5ml,成形便和肛拭子诊断意义很小。标本置4℃可存放2~3周,运送也要低温条件。病人呕吐物是粪便标本的最佳补充,有助于病原的诊断。该标本的采集、储存和运送条件同于粪便。从流行病学角度出发,在水、食物或其它外环境标本中检出nv意义重要。需注意检测技术要锁定在高度怀疑的传播媒介上,尽早采样并置4℃存放,若是饮用水,需用大容量(5~100l)浓集病毒后检测。
二、实验室检测:
1、电镜检查:电镜法分直接电镜法(em)和免疫电镜法(iem),em 法观察的灵敏度较低,要求每毫升粪便样品中至少有大约 106个病毒粒子,因此只能用于患病早期病毒大量排出时采集的样本检测。iem 法比 em 法的敏感性可提高 100 倍,主要应用患者恢复期血清捕捉同型抗原,从而增加检出率。电镜法的缺陷在于设备昂贵,不能广泛普及;检测结果与操作者的技能和经验有直接关系;灵敏度相对较低;不适于大规模流行病学调查。
2、免疫法:免疫法包括放射免疫法(ria)、生物素-亲和素免疫法(biotin-avidin immunoassy)和酶联免疫法(elisa)。ria法的灵敏度比iem 法可提高10~100倍,可以检测出抗体升高的水平,为流行病学提供更有参考价值的资料。ria 法的不足之处在于它需要 6 d,且需要放射性同位素标记。为了简化方法,美国疾病预防控制中心建立了生物素-亲和素免疫法,其灵敏度与 ria 法相当,该方法已成为美国疾病预防控制中心检测nlv抗原和抗体的标准实验方法之一。1992年jiang 等重组杆状病毒表达nv衣壳蛋白成功后,建立起的 nv 酶联免疫检测方法快速、灵敏、经济,其不足之处是免疫反应的株型特异性太强,所以应用范围还比较窄。酶链免疫法特异性强,灵敏度高,诊断迅速,且较经济,是可广泛应用的检测方法。
3、分子生物学检测:分子生物学检测方法杂交技术和逆转录聚合酶链反应(rt-pcr)除了能更准确、灵敏地检测标本中的nv,尤其是低浓度的nv感染外,最大的优点在于可以进一步对病毒进行基因型的研究,不会受到获得分型单克隆抗体的限制,对流行病学研究具有重要意义。等温核酸扩增法(nasba)直接扩增rna 来检测 nv,样品中病原rna得到指数级扩增,产物通过琼脂糖凝胶电泳或斑点印迹杂交鉴定结果。该方法的灵敏度略低于 rt-pcr 法;整个过程只有一步rna扩增,避免了rt-pcr存在的rna交叉污染;缩短了操作时间;假阳性率低。rt-pcr检测食物中nv存在样品病毒量含量低,样品量大且成分复杂等问题,因此病毒富集浓缩、样品处理是检测的关键,其中有两个重要方面影响检测结果,一是样品中病毒浓缩后的回收率,二是抽提核酸的完整程度和纯度。病毒浓缩病毒浓缩 nv 浓缩方法一般分为两大类,一类为有机絮凝沉淀法,主要使用聚乙二醇(peg)沉淀,peg 是具有强烈吸水性以及凝聚和沉淀蛋白作用的高分子聚合物,先改变样品 ph 值,使毒粒与样品微粒分开,peg 把病毒沉淀下来,达到浓缩的目的。目前对于固体样品 peg 沉淀法是最有效的浓缩方法。膜过滤法是另一类有效浓缩病毒的方法,通过改变膜的ph值使之与带有电荷的毒粒结合捕捉病毒,这种方法通常用在浓缩大体积的黏度小、内容颗粒小的液体食品或水中。检测海水、生活污水中的nv曾用过这种方法,为瓶装水和其他饮料浓缩nv提供了参考。核酸提取食品样品成分复杂,所含有的脂肪、蛋白质、金属离子等物质都是 rt-pcr 反应抑制因子。nv是单链rna病毒,核酸提取方法的优劣取决于两个方面:核酸的质量和去除抑制因子的能力。应用较成熟广泛的是胍法 rna 提取法,即(异)硫氰酸胍-苯酚-氯仿联合裂解抽提法,该方法改进后制成市售的trizol、rnazol、ultraspec 等产品,与石英砂、磁珠等多孔颗粒相结合,已结合了poly(dt)或特异探针的磁珠能较高程度的提纯mrna,去除反应抑制因子。石英砂或磁珠纯化 rna与传统的有机试剂(异丙醇、乙醇)沉淀 rna 相比起来,效果较好,只是成本偏高。
网吧病毒检测申请书篇二
山东烟台解放军107医院肝病中心供稿|/
什么是病毒ymdd检测
病毒ymdd检测技术能够判断病毒类型,了解病毒是否变异耐药、是否传染、是否需要治疗,并评估患者用哪种药有效,用哪种药无效等,对实现乙肝的科学转阴提供了坚实、精准的数据支持,专家根据这些检测数据配合乙肝治疗最新方法进行治疗,提升乙肝的治愈率。
病毒ymdd检测的原理
病毒ymdd检测是国外的一种新技术,就是抽取患者的血液,在该设备上面进行化验。可以准确的查明您体内的乙肝病毒是否变异耐药、病毒存在数量、是否复制、是否传染、传染性有多大、以及决断病人适合用哪一类抗病毒药物才是适应症。
原来乙型肝炎病毒和其它病毒一样,在复制过程中可产生多种变异,它的变异是在慢性感染过程中为适应生存环境而自然发生的,也可于发生在应用药物或接种疫苗后。国内外研究表明,拉米夫定治疗期间,病毒dna编码的dna聚合酶基因序列发生了变异,这种变异在ymdd序列及其附近,因而称为ymdd变异。ymdd变异既有在拉米夫定应用后出现的,也有病人未用过拉米夫定却出现了ymdd变异。当长期应用拉米夫定时,发生ymdd变异的比率逐年增加,据来自台湾的文献报道,应用拉米夫定1年时的平均ymdd变异率约为14%,2年、3年和4年分别为38%、49%和66%。
因为病毒变异的缘故,临床通常把病毒株分为野毒株和变异株,ymdd变异株对临床预后和病毒学反应具有重要意义。当病毒发生了ymdd变异后,拉米夫定失去了对病毒的抑制作用,病毒重新出现复制,会伴有hbvdna水平反跳和肝功能变化,甚至导致病情恶化。故开展ymdd变异的检测很有必要,对及时调整治疗方案、合理用药及提高疗效具有重要意义。
ymdd检测的临床意义
1、能够检测出体内乙肝病毒的数量。
2、能够检测乙肝病毒是否存在耐药性。
3、能够检测是否具有传染性以及传染性的强弱。
4、能够检测体内乙肝病毒复制的程度。
5、能够针对不同病情的患者,提供合适的治疗药物。
山东烟台解放军107医院肝病中心供稿|/ 资料来源:山东烟台解放军107医院肝病中心
网吧病毒检测申请书篇三
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艾滋病已经确认是由一种逆转录病毒引起的。1983年著名的法国巴斯德研究所肿瘤病毒室主任蒙嗒尼尔(montagnier)首先从一名患淋巴结病综合症的男性同性恋者的淋巴结中分离到一种艾滋病的淋巴结病相关病毒(lymphaenopathy
associated virus)简称lav。1984年美国国立肿瘤研究所的研究人员也报告从艾滋病病人血液标本中分离到多株逆转录病毒,因为这种病毒主要侵犯那些起免疫作用的淋巴细胞,所以命名为嗜人th淋巴细胞三型病毒(human
t-lymphotrophic virusⅲ)简称htlv-ⅲ。这两种病毒被认为是同一种逆转录病毒的变种,并肯定为引起艾滋病的病原体、把它称为lav/ltlv-ⅲ。
1986年7月25日,世界卫生组织(who)发布公报,国际病毒分类委员会会议决定,将艾滋病病毒改称为人类免疫缺陷毒(hmuan immunodeficiency virus)简称hiv。
hiv呈袋状球形,直径约150毫微米,包膜由一薄层类脂质构成,具有抗原性。hiv有10%碱基序列不同。是单链rna病毒,外有核壳蛋白,此外还有一种特殊的逆转录酶,能以单链rna作为模块,转录为双链dna,该双链dna可与宿主细胞的dna结合然后逆转录为病毒的单链dna,因此感染艾滋病病毒后,病毒的核酸永远与宿主细胞结合在一起,使得感染不能消失,机体无法清除病毒。现已证实hiv是嗜t4淋巴细胞和嗜神经细胞的病毒。hiv由皮肤破口或粘膜进入人体血液,主要攻击和破坏的靶细胞t4淋巴细胞(t4淋巴细胞在细胞免疫系统中起着中心调节作用,它能促进b细胞产生抗体),便得t4细胞失去原有的正常免疫功能。当激活免疫反应的t4细胞几乎全部被hiv消除,t4细胞抑制细胞在数量上巨增,相反病人体内t4细胞在数量上骤减,从而导致病人的免疫功能全部衰竭,为条件性感染创造了极为有利的条件。
hiv对神经细胞有亲合力,能侵犯神经系统,引起脑组织的破坏,或者继发条件性感染而致各种中枢神经系统的病变。
hiv和其它逆转录病毒一样,当逆转录酶使病毒的rna作为模板合成dna而成前病毒dna整合到宿主细胞的dna中时,hiv带有的致癌基因可使细胞发生癌性转化,特别是在细胞免疫遭到破坏,丧失免疫监视作用的情况下,细胞癌变更易发生。
首先,hiv-1感染人体后,选择性的吸附于靶细胞的cd4受体上,在辅助受体的帮助下进入宿主细胞。经环化及整合、转录及翻译、装配、成熟及出芽,形成成熟的病毒颗粒。在24—48小时内到达局部淋巴结。通常在2-4周左右,人体艾检试纸网 http://
会产生一些反应,临床主要有发热、咽痛、恶心、腹泻、关节痛、淋巴结肿大及神经系统症状。多数患者临床症状轻微,持续1-3周后缓解。
经过急性期感染,就进入了潜伏期,也就是无症状期。这个时期约占感染到死亡整个过程的80%。这时大多数感染者表面上与健康人无区别,只有体内的病毒在与自身的免疫系统相抗争。无症状期持续的时间可长可短,少则2年,多的可达20年。其长短和感染途径密切相关。一般情况下,经血感染者(主要为非法采血与共用注射器)为4~5年,性传播感染一般为11~13年。如果一个艾滋病感染者的无症状期能达到13年,就可以被称为长期生存者了。
随着潜伏期病毒不断的摧毁人体大量的免疫细胞,而骨髓通过加速生成的新细胞加以补偿,但补充速度永远赶不上细胞损失的速度。一个正常的体内,每立方毫米血液中约有800至1000个免疫细胞,而艾滋病感染者体内,每立方毫米血液的免疫细胞则以每年50—70个的速度逐渐下降,当免疫细胞减少到在一立方毫米血液中只有200个左右时,下降速度就会加快。当病人进入最后的艾滋病期,cd4+ t淋巴细胞计数明显下降,hiv血浆病毒载量明显升高。此期主要临床表现为hiv相关症状、各种机会性感染及肿瘤。此时,如果一些平时对一般人的生命不会产生威胁的普通的传染病如肺炎,一旦此病进入艾滋病感染者体内,就会无法控制,一般会再6-24个月死亡。
艾滋病感染者存活的时间因人而异。除了潜伏期时间不同,发病后艾滋病患者的存活时间主要与其感染的hiv亚型病毒有很大关系:a亚型病毒感染者的平均存活时间为8.8年,而d亚型病毒感染者的平均存活时间降至为6.9年,而d亚型和a亚型病毒的混合感染者的存活时间更短,平均只有5.8年。
如果确诊为艾滋病感染者,千万不可以擅自滥用抗病毒药,一定要积极配合治疗,听从医生的治疗方案,可以延长潜伏期的时间,和正常人一样的生活
健康不但是人生的第一财富,更是生命的象征,幸福的保证。由此可见,保持身体健康对人生的重要性不言而喻。然而,由于部分高危人群不能积极正确对待艾滋病,不愿或不主动接受检测,导致我国目前近50万艾滋病病毒感染者尚未发现,进而增加了传播的风险。
很显然,在“防艾”工作日益形势严重的情形下,我们每一位公民都应该有义务和责任为此而做些什么。积极主动面对艾滋病,保持自我健康,不仅仅是艾滋病艾检试纸网 http://)提醒,艾滋病的前兆没有特异性,出现症状并不说明感染艾滋病,其他原因同样会引起,自己切不可“对症入座”。应该在窗口期11天后及时做hiv核酸检测,以检测结果作为艾滋病诊断标准,早发现早治疗,争取最佳治疗时机,最大限度延长生命。
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